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武漢科銳諾生物科技有限公司

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透射電鏡的總體工作原理是：由電子發(fā)射出來(lái)的電子束，在真空通道中沿著鏡體光軸穿越聚光鏡，通過(guò)聚光鏡將之會(huì)聚成一束尖細(xì)、明亮而又均勻的光斑，照射在樣品室內(nèi)的樣品上；透過(guò)樣品后的電子束攜帶有樣品內(nèi)部的結(jié)構(gòu)信息，樣品內(nèi)致密處透過(guò)的電子量少，稀疏處透過(guò)的電子量多；經(jīng)過(guò)物鏡的會(huì)聚調(diào)焦和初級(jí)放大后，電子束進(jìn)入下級(jí)的中間透鏡和、第2投影鏡進(jìn)行綜合放大成像，終被放大了的電子影像投射在觀察室內(nèi)的熒光屏板上；熒光屏將電子影像轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)光影像以供使用者觀察。本節(jié)將分別對(duì)各系統(tǒng)中的主要結(jié)構(gòu)和原理予以介紹。

陰極 陰極是產(chǎn)生自由電子的，一般有直熱式和旁熱式2種，旁熱式陰極是將加熱體和陰極分離，各自保持獨(dú)立。在電鏡中通常由加熱燈絲（filament）兼做陰極稱(chēng)為直熱式陰極，材料多用金屬鎢絲制成，其特點(diǎn)是成本低，鐵死亡透射電鏡服務(wù)，但亮度低，壽命也較短。燈絲的直徑約為0.10～0.12mm，當(dāng)幾安培的加熱電流流過(guò)時(shí)，即可開(kāi)始發(fā)射出自由電子，不過(guò)燈絲周?chē)仨毐３指叨日婵?，否則就象漏氣燈泡一樣，加熱的燈絲會(huì)在傾刻間被氧化燒毀。燈絲的形狀常采用的是發(fā)叉式，也有采用箭斧式或點(diǎn)狀式的，后 2種燈絲發(fā)光亮度高，光束尖細(xì)集中，適用于高分辨率電鏡照片的拍攝，但使用壽命更短。

生物醫(yī)學(xué)樣品在做透射電鏡觀察時(shí)，基本上都是將原始樣品以環(huán)氧樹(shù)脂包埋，然后用非常精密的超薄切片機(jī)切成薄片，刀具為的玻璃刀或者是鉆石刀。切下的生物醫(yī)學(xué)樣品的厚度通常只有幾十個(gè)納米（nm），這在一般情況下用肉眼是不能直接看到的，必須讓切片飄浮在水面上，由操作熟練的技術(shù)人員借助特殊的照明光線(xiàn)，并以特殊的角 度才能觀察到如此薄的切片。切好的薄片被撈放在銅網(wǎng)上，經(jīng)過(guò)染色和干燥后才能用于觀察.透射電鏡樣品的制作是一個(gè)漫長(zhǎng)、復(fù)雜而又精密的過(guò)程，技術(shù)性非常強(qiáng)。但是我們前面介紹過(guò)，要想獲得優(yōu)良的電鏡影像，制做優(yōu)良的樣品標(biāo)本乃是非常重要的步。

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